PIERCE超敏型發(fā)光液的注意事項有幾點
瀏覽次數(shù):1731發(fā)布日期:2021-09-21
PIERCE超敏型發(fā)光液高靈敏度,可檢測到少于10--19moles的HRP分子.極低的背境,*的信噪比.約30秒達平臺期,平臺期可維持5分鐘,持續(xù)發(fā)光12小時以上.采用滴蓋瓶包裝,每滴50ul,加液非常方便,且避免交叉污染;也可以打開蓋后以移液器加液.
PIERCE超敏型發(fā)光液直接或間接檢測與辣根過氧化物酶HRP關(guān)聯(lián)的蛋白或核酸底物。這一*的發(fā)光底物系統(tǒng)是目前靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑,具有*靈敏度和高信噪比,可檢測出10-100fg的微量抗原;發(fā)光迅速,熒光可使X感光膠片感光達12小時以上,特別適用于痕量蛋白或核酸檢測。同時該試劑允許使用更高的抗體稀釋倍數(shù),極其節(jié)省抗體。
PIERCE超敏型發(fā)光液的注意事項:
1.允許步驟2-5在日光燈下進行方便操作;但在強光下操作時間拖得太長,靈敏度可能會有一定程度降低,移到暗房操作可避免之。
2.戴手套可以避免在膜上留下手印。
3.長時間曝光或蛋白過量,將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關(guān)系。
4.與工作液孵育1-5分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見,低豐度蛋白條帶可能發(fā)光較弱,但仍可成功進行X光膠片曝光。不能簡單以肉眼觀察判斷條帶發(fā)光時間。熒光可持續(xù)10小時以上,條帶弱時可延長曝光至1-10個小時。
5.由于PIERCE超敏型發(fā)光液及其靈敏,對大多數(shù)來源的進口抗體我們強烈推薦抗體的起始濃度為一抗1:1000,二抗1:2000。通常為一抗1:2000二抗1:4000或更加稀釋。抗體濃度過高將造成高背景或沒有條帶,導致失敗!
6.某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光,應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜。
7.使用預染色蛋白Marker和熒光-放射自顯影曝光標簽可確定條帶位置和大小。