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Qiagen質(zhì)粒純化試劑盒QIAGEN Plasmid Midi Kit

傳統(tǒng)的QIAGEN Plasmid Giga Kits應(yīng)用重力流陰離子交換柱QIAGEN-tip 100 高效純化質(zhì)粒DNA，也單獨(dú)提供QIAGEN-tips 100。

* 實(shí)際產(chǎn)量取決于質(zhì)?？截悢?shù)、插入片段大小、宿主菌、培養(yǎng)基和培養(yǎng)體積。
† 培養(yǎng)體積取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)、插入片段大小、宿主菌和培養(yǎng)基。

原理

QIAGEN *的陰離子交換柱于核酸純化，其的抽提性能可確保DNA純度相當(dāng)于甚至高于兩次CsCl梯度離心的產(chǎn)物。預(yù)裝的QIAGEN柱子以重力流方式純化，不會(huì)流干，將質(zhì)粒制備所需的手工操作時(shí)間降至zui少。整個(gè)質(zhì)粒純化系統(tǒng)避免了苯酚、氯仿、ethidium bromide和CsCl等有毒物質(zhì)，將對(duì)用戶和環(huán)境的危害降至zui低。

操作步驟

應(yīng)用QIAGEN Plasmid Kits純化過(guò)程中，通過(guò)離心取出細(xì)菌裂解液。然后將澄清的裂解液裝入陰離子交換柱，在適當(dāng)?shù)牡望}濃度和pH值條件下，陰離子交換柱會(huì)選擇性地結(jié)合質(zhì)粒DNA。RNA、蛋白質(zhì)、代謝物和其他小分子雜質(zhì)通過(guò)中鹽濃度洗滌去除，應(yīng)用高鹽濃度緩沖夜洗脫超純的質(zhì)粒DNA（見(jiàn)流程圖"Comparison of QIAGEN Plasmid Kit Procedures"）。通過(guò)異丙醇沉淀濃縮并脫鹽DNA，離心法收集DNA。

應(yīng)用

QIAGEN Plasmid Kits 純化所得的質(zhì)粒DNA非常適合于諸如轉(zhuǎn)染、克隆、手動(dòng)或自動(dòng)測(cè)序（包括毛細(xì)管測(cè)序）和體外轉(zhuǎn)錄等應(yīng)用。